預(yù)染蛋白Mark操作使用方法

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產(chǎn)品簡介

EZ Mark彩色預(yù)染蛋白分子量標準包含了從10k到180k共10種高度純化并預(yù)染的重組蛋白質(zhì)(10, 17, 25, 33, 40, 53, 70, 95, 130, 180k, 均帶His標簽)，其中70kD條帶為橙色，10k為綠色，其余條帶為藍色，適合作為SDS-PAGE和Western的蛋白質(zhì)分子量標準。本彩色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標準已經(jīng)配制在1×SDS-PAGE上樣緩沖液中，直接使用，不要煮沸、稀釋，也不需要加入還原劑處理。

根據(jù)上樣孔的大小，EZ Mark彩色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標準通常每次上樣5-10微升（5×1.5mm膠孔5μL足夠），即可在電泳時、電泳后和轉(zhuǎn)膜后觀察到非常清楚的蛋白條帶。

使用方法

1. 室溫下解凍后輕輕混勻或者是用移液槍緩慢吹打均勻，不要煮沸。

2. 取本產(chǎn)品5ul與實驗樣品同時進行聚丙烯酰胺凝膠電泳；

注：用戶可以根據(jù)目標蛋白濃度、實驗條件和實驗習(xí)慣通過預(yù)實驗確定合適的上樣量，可以節(jié)約成本，獲得更佳實驗圖片。

保存條件

冰袋運輸，-20℃長期保存，或4℃短期保存。

注意事項

1. Page膠內(nèi)孔徑隨膠度變化，在低濃度膠時，小分子量的蛋白標準遷移速度大于指示劑，會泳動于染料前緣，大小分質(zhì)量標準間距也相對較小。
2. 在做Western blot時，大分子量蛋白需要更長的轉(zhuǎn)膜時間或更高轉(zhuǎn)膜的壓，蛋白質(zhì)標準也是如此。
3. 購置凍干Marker產(chǎn)品的客戶，如果需要自己配制凍存液，可參考配方：

儲存液：67 mM Tris-H3PO4, pH7.5, 5mM EDTA, 2 % (W/V) SDS, 33 % (V/V) Glycerol, 0.02 % (V/V) proclin300

     4.預(yù)染蛋白質(zhì)因染料與蛋白結(jié)合，在不同的緩沖體系下，染料分子所帶電荷可能會有不同，因而表現(xiàn)為不同緩沖體系下有不同的表觀分子量。EZ Mark彩色預(yù)染蛋白質(zhì)標準在Trisglycine （Tris-甘氨酸體系，zui為常用）和BisTrisMops體系下表觀分子量如下圖。 如用其他緩沖體系，可事先用非預(yù)染蛋白質(zhì)標準大致確定EZ Mark彩色蛋白質(zhì)標準的表觀分子量。