使用CCK-8要注意的事項(xiàng)有哪些

更新時(shí)間：2021-10-25

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　　CellCountingKit-8（簡稱CCK8）試劑可用于簡便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析。相信做細(xì)胞的同學(xué)對他都很熟悉，你確定你使用CCK-8試劑的方式是*正確的嗎？

使用CCK-8要注意的事項(xiàng)有哪些：

　　1.酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾，可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去。

　　2.CCK8可以檢測大腸桿菌，但不能檢測酵母細(xì)胞。在細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每次測定的過程中需要避免細(xì)菌污染，以免影響結(jié)果。

　　3.當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)板最外一圈的孔最容易干燥揮發(fā)，由于體積不準(zhǔn)確而增加誤差。一般情況下，最外一圈的孔只加培養(yǎng)基，不作為測定孔用。

　　4.在培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時(shí)間，測定450nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實(shí)驗(yàn)時(shí)，還應(yīng)考慮藥物的吸收，可在加入藥物的培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時(shí)間，測定450nm的吸光度作為空白對照。

　　5.金屬對CCK8顯色有影響：當(dāng)終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會抑制5%、15%、90%的顯色反應(yīng)，使靈敏度降級。如果終濃度是10mM的話，將會100%抑制。

　　6.懸浮細(xì)胞由于染色比較困難，一般需要增加細(xì)胞數(shù)量和延長培養(yǎng)時(shí)間。